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奶牛乳脂代谢关键miRNAs的筛选及鉴定
引用本文:刘佳敏,禹保军,母童,张迪,冯小芳,张娟,王影,温万,顾亚玲.奶牛乳脂代谢关键miRNAs的筛选及鉴定[J].畜牧兽医学报,2022,53(12):4244-4257.
作者姓名:刘佳敏  禹保军  母童  张迪  冯小芳  张娟  王影  温万  顾亚玲
作者单位:1. 宁夏大学农学院, 银川 750021;2. 宁夏回族自治区反刍动物分子细胞育种重点实验室, 银川 750021;3. 宁夏畜牧工作站, 银川 750002
基金项目:宁夏自治区农业育种专项(优质高产奶牛选育)(2019NYYZ05);宁夏回族自治区重点研发项目(2022BBF02017)
摘    要:旨在探究影响中国荷斯坦奶牛乳脂代谢过程的关键miRNAs及靶mRNAs。本研究选择泌乳中后期(150~220 d)的第一胎次且乳脂率具有极端差异的8头宁夏荷斯坦奶牛,根据乳脂率的差异分为两组:高乳脂组和低乳脂组,每组4个重复。采集8头奶牛的奶样分离乳腺上皮细胞,进行转录组测序和生物信息学分析,筛选出差异表达miRNA-mRNA并与乳脂率进行相关性分析。通过实时荧光定量PCR验证miRNAs和mRNAs表达。结果表明,8个small RNA (sRNA)文库测序获得11 976 914~16 235 680的clean reads,占总raw reads的比例均在97%以上,Q30达到91%以上,sRNA片段长度主要分布在21~24 nt。在高乳脂组和低乳脂组间共鉴定了34个差异表达miRNAs (16个上调,18个下调)。GO和KEGG富集分析表明,差异表达miRNAs的靶基因在细胞内信号转导、单一生物体过程、激酶结合和磷酸转移酶活性等功能条目显著富集,并且显著富集到TNF信号传导途径、MAPK信号传导途径、Ras信号传导途径、Rap1信号通路和催产素信号传导途径等乳脂代谢相关通路。通过miRNA-mRNA综合分析,共获得16个miRNA-靶基因对,其中miR-1343-3p和MTM1与乳脂率显著负相关,miR-370、miR-2285cb和SRRM2与乳脂率显著正相关。RT-qPCR验证差异表达miRNA和mRNA与转录组测序表达趋势一致。这些结果从miRNA和mRNA水平探究了宁夏地区荷斯坦奶牛乳脂代谢的功能机制,鉴定出miR-370-MTM1、miR-1343-3p-DIS3L2、miR-2285cb-XLOC-122799和miR-2387-SRRM2互作对可能是调控奶牛乳脂代谢的关键因子。

关 键 词:miRNA  乳脂  中国荷斯坦奶牛  转录组学  miRNA-mRNA互作  
收稿时间:2022-05-26

Screening and Identification of Key miRNAs for Milk Fat Metabolism in Dairy Cattle
LIU Jiamin,YU Baojun,MU Tong,ZHANG Di,FENG Xiaofang,ZHANG Juan,WANG Ying,WEN Wan,GU Yaling.Screening and Identification of Key miRNAs for Milk Fat Metabolism in Dairy Cattle[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2022,53(12):4244-4257.
Authors:LIU Jiamin  YU Baojun  MU Tong  ZHANG Di  FENG Xiaofang  ZHANG Juan  WANG Ying  WEN Wan  GU Yaling
Institution:1. College of Agriculture, Ningxia University, Yinchuan 750021, China;2. Key Laboratory of Ruminant Molecular Cell Breeding, Ningxia Hui Autonomous Region, Yinchuan 750021, China;3. Animal Husbandry Extension Station, Yinchuan 750002, China
Abstract:
Keywords:
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