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脂质体LTX介导高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)条件的优化
引用本文:丰秀静,曹少先,孟春花,王慧利,钱勇,王锋,成勇.脂质体LTX介导高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)条件的优化[J].江苏农业学报,2011,27(3).
作者姓名:丰秀静  曹少先  孟春花  王慧利  钱勇  王锋  成勇
作者单位:1. 江苏省农业科学院畜牧研究所,江苏南京210014;南京农业大学动物科技学院,江苏南京210095
2. 江苏省农业科学院畜牧研究所,江苏南京,210014
3. 南京农业大学动物科技学院,江苏南京,210095
4. 扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009
基金项目:转基因生物新品种培育重大专项
摘    要:探讨获得外源基因高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)的方法,为筛选出体细胞核移植的供核细胞,制备转基因山羊提供技术基础。该研究以绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因,采用脂质体LipofectaminTM LTX+PLUSTMReagent介导,对细胞接种量、质粒DNA用量、脂质体与质粒DNA比例、脂质体-DNA复合物与细胞作用时间进行优化,荧光显微镜下统计转染后24h的转染效率。结果显示:在24孔培养板中,每孔接种细胞6×104个,24h后进行转染,质粒DNA每孔0.6μg,脂质体与质粒DNA比例为4.5:1.0,脂质体-DNA复合物与细胞作用时间为6 h时,转染效率最高,达到81.2%。

关 键 词:山羊胎儿成纤维细胞  转染效率  脂质体  绿色荧光蛋白

Optimization of transfection system of goat fetal fibroblast cells mediated by LipofectaminTM LTX
FENG Xiu-jing,CAO Shao-xian,MENG Chun-hua,WANG Hui-li,QIAN Yong,WANG Feng,CHENG Yong.Optimization of transfection system of goat fetal fibroblast cells mediated by LipofectaminTM LTX[J].Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,2011,27(3).
Authors:FENG Xiu-jing  CAO Shao-xian  MENG Chun-hua  WANG Hui-li  QIAN Yong  WANG Feng  CHENG Yong
Abstract:
Keywords:
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