诱导牛精子体外获能的培养基及方法

用去透明带金黄地鼠异种精子体外穿透试验，检测冻精复苏经各种处理后的精子穿卵率。发现在４种基本培养基（ＢＯ、ｍＢＷＷ、ＴＹＨ、ＨａｍＦ１０＋ＲＰＭＩ－１６４０）中不加亚牛磺酸时，牛精子不能耐受较高浓度（４μｍｏｌ／Ｌ）钙离子载体（ＩＡ）的刺激（以１０ｍｉｎ计）；而低浓度ＩＡ（低于４μｍｏｌ／Ｌ）处理精子不能诱导获能。生物活性物质，如肝素、咖啡因、亚牛磺酸、肾上腺素单独或联合低浓度ＩＡ处理精子，短期（６ｈ）内也不能诱导获能。当基本培养基中含有亚牛磺酸时，牛精子能耐受高浓度ＩＡ（１０μｍｏｌ／Ｌ）的刺激，并使牛精子获能；亚牛磺酸与肾上腺素、咖啡因联合使用，并在获能液中添加透明质酸酶时，穿卵率进一步提高，获能效果显著改善。以ＨａｍＦ１０＋ＲＰＭＩ１６４０为主的混合培养基，在牛精子的存活时间、穿卵率等方面优于ＢＯ、ｍＢＷＷ、ＴＹＨ培养基。结果表明，用Ｆ１０和１６４０的混合培养基，添加亚牛磺酸、肾上腺素、咖啡因、透明质酸酶，经１０μｍｏｌ／ＬＩＡ处理牛精子１０～１５ｍｉｎ，是快速诱导牛精子体外获能的有效方法

Media and Methods to Induce Bull Sperm in Vitro Capacitation