抗天牛基因cryⅢA的改造及人工合成

采用中国林科院林业研究所生物技术室开发的核酸序列分析软件tRNA SYSTEM分析了4000个杨树形成层基因氨基酸的三联体遗传密码，得出了一套适合于在杨树形成层高效表达的密码子，并通过该密码子，对从苏云金芽孢杆菌菌株Bt．886中克隆的、具有抗天牛作用的cryⅢA基因进行了改造。在两端加上合适的酶切位点后，人工合成了最长为90bp的小片段，再经PCR延伸及T4连接酶拼接成全长为1812bp的基因。利用两端设计的酶切位点，将全长基因克隆到克隆载体PUC119上，为进一步用于在杨树形成层特异表达的研究打下了基础。