| 弓形虫CDPK1-EF基因的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 刘思嘉,徐前明,李培英. 弓形虫CDPK1-EF基因的克隆与原核表达[J]. 畜牧与兽医, 2014, 0(2): 5-9 |
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| 作者姓名： | 刘思嘉 徐前明 李培英 |
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| 作者单位： | ;1.安徽农业大学动物科技学院 |
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| 摘 要： | CDPK是一类钙依赖蛋白激酶,其可参与调控寄生虫入侵,外出宿主细胞,配子的形成及在宿主体内移行等。采用RT-PCR技术,扩增弓形虫RH株目的基因钙依赖蛋白激酶EF模体(CDPK1-EF),然后将其克隆至表达载体pET-32a,以构建重组质粒ET-32a-CDPK1-EF,经IPTG诱导目的蛋白表达,并采用Ni-NTA亲和层析法纯化,最后经SDS-PAGE分析重组表达蛋白。结果,成功地克隆出弓形虫CDPK1-EF基因,序列比对表明,其与GenBank报道的相关序列同源性达100%。采用SDS-PAGE技术对诱导表达蛋白以及纯化产物检测发现37 ku目的蛋白出现,与预期结果相一致。本文在国内首次成功克隆和表达弓形虫RH株CDPK1-EF基因,这为研究该基因功能及分布特征等提供了基础。
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| 关 键 词： | 弓形虫 CDPK1-EF基因 克隆 表达 |
Cloning and prokaryotic expression of Toxoplasma gondii CDPK1- EF gene |
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