| IBDV VP2/4/3、ChIL-18共表达载体的构建及在Vero细胞上的表达 |
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| 作者姓名： | 侯贤宏 魏永伟 章晓栋 于涟 |
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| 作者单位： | 浙江大学,动物科学学院,浙江省动物预防医学重点实验室/农业部动物疫病病原学与免疫控制重点实验室,浙江,杭州,310029 |
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| 基金项目： | 浙江省重点科技攻关计划资助项目 |
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| 摘 要： | 为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白(VP2/4/3)DNA疫苗的免疫效果,应用重叠延伸剪切技术(splicing by overlapping extension)将IBDV VP2/4/3基因与鸡白细胞介素18(ChIL-18)基因分别经3次PCR获得融合基因片段VP2/4/3-ChIL-18和ChIL-18-VP2/4/3,将融合基因片段定向插入真核表达载体pCI中,获得重组质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18和pCI-ChIL-18-VP2/4/3;应用PCR法,在本实验室已成功构建的重组真核表达载体pCI-VP2/4/3和pCI-ChIL-18的基础上,构建VP2/4/3基因和ChIL-18基因的共表达载体co-pCI-VP2/4/3-ChIL-18。在脂质体介导下将上述重组真核表达载体转染Vero细胞,间接免疫荧光证实重组质粒能正常表达目的蛋白,表达的蛋白具有免疫反应性。这为进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用及研制高效、价廉的IBDV DNA疫苗提供了实验依据。
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| 关 键 词： | 基因融合 共表达 DNA疫苗 间接免疫荧光 |
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