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辣椒SRAP-PCR反应体系主要影响因素的单因素和正交设计优化
引用本文:何建文,杨文鹏,韩世玉,杨红.辣椒SRAP-PCR反应体系主要影响因素的单因素和正交设计优化[J].种子,2009,28(9).
作者姓名:何建文  杨文鹏  韩世玉  杨红
作者单位:1. 贵州省辣椒研究所,贵州,遵义,563000;贵州省旱粮研究所,贵阳,550006
2. 贵州省旱粮研究所,贵阳,550006;贵州省农业生物技术重点实验室,贵阳,550006
3. 贵州省辣椒研究所,贵州,遵义,563000
基金项目:贵州省"十一五"科技攻关项目(黔科合NZ字 
摘    要:SRAP标记是一种新的分子标记技术,建立和优化所研究物种的SRAP反应体系是应用SRAP标记的技术关键.本研究以3个辣椒品种为试验材料,采用单因素试验设计对辣椒SRAP-PCR反应体系的5个主要影响因子(Taq 酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物浓度)设置8个不同的水平梯度,筛选出比较适宜的Mg2+、dNTP、Primer、Taq酶、模板DNA浓度的范围.在此基础上,进一步采用L16(45)正交设计对辣椒SRAP-PCR反应体系的五因素在四个水平上进行优化实验,得出了如下的优化体系:25μl体系中包含1.5 mmol/L的Me2+、0.2 mmol/L的dNTP、0.1μmol/L的单条引物、1 U的Taq酶和60 ng的模板DNA.经用24个辣椒材料进行扩增验证,该体系检测的结果重复性好,稳定性强.因此,本试验所获得的优化体系适用于辣椒的SRAP分子标记研究.

关 键 词:辣椒  优化

Single Major Influencing Factor and It's Orthogonal Optimized Design of SRAP-PCR in Hot Pepper (Capsicum annum L.)
HE Jian-wen,YANG Wen-peng,HAN Shi-yu,YANG Hong.Single Major Influencing Factor and It's Orthogonal Optimized Design of SRAP-PCR in Hot Pepper (Capsicum annum L.)[J].Seed,2009,28(9).
Authors:HE Jian-wen  YANG Wen-peng  HAN Shi-yu  YANG Hong
Abstract:
Keywords:SRAP-PCR
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