| 四倍体菘蓝ISSR-PCR反应体系优化与遗传差异分析 |
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| 引用本文： | 段英姿.四倍体菘蓝ISSR-PCR反应体系优化与遗传差异分析[J].江苏农业科学,2012,40(9):36-39. |
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| 作者姓名： | 段英姿 |
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| 作者单位： | 唐山师范学院生命科学系,河北唐山,063000 |
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| 基金项目： | 河北省唐山市科技攻关项目(编号:04360701B-10) |
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| 摘 要： | 采用单因子试验,研究引物、dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶及退火温度对PCR扩增的影响,用其建立优化四倍体菘蓝的ISSR-PCR反应体系,分析不同四倍体菘蓝株系的遗传差异性.结果发现ISSR-PCR最佳反应体系为:在25 μL的反应体系中,引物浓度为0.76 μmol/L,dNTPs浓度为190 μmol/L,MgCl2浓度为200 μmol/L,Taq DNA 聚合酶用量为1.5U,模板DNA浓度为20 ng/μL;确定了不同引物最佳退火温度；菘蓝株系间具有中等偏高的遗传差异性,多态性条带达58.22％.表明采用单因子试验可以快速建立ISSR-PCR反应体系,可用于菘蓝遗传差异性分析.
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| 关 键 词： | 四倍体 菘蓝 遗传差异性 ISSR-PCR 退火温度 |
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