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蛙虹彩病毒巢式 PCR检测方法的建立
引用本文:张旻,林祥梅,江育林. 蛙虹彩病毒巢式 PCR检测方法的建立[J]. 中国水产科学, 2011, 18(3): 661-666. DOI: 10.3724/SP.J.1118.2011.00661
作者姓名:张旻  林祥梅  江育林
作者单位:中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所,北京,100029
基金项目:国家质量监督检验检疫总局科技项目,中国检验检疫科学研究院(CAIQ)基础科研业务经费项目
摘    要:蛙虹彩病毒属(Ranavirus)病毒宿主广泛,可以感染爬行类、鱼类和两栖类,大部分病毒对宿主都有较强的致病性和致死性.为建立一种快速高效的蛙虹彩病毒的检测方法,本研究利用中华鳖虹彩病毒(soft-shelled Turtle Iridovirus,STIV)核衣壳蛋白(Major Capsid Protein,MCP)基因保守区设计内引物和外引物,建立了特异性检测流行性造血器官坏死病毒(Epizootic Haematopoietic Necrosis Virus,EHNV)、中华鳖虹彩病毒和虎纹蛙虹彩病毒(Tiger Frog Virus,TFV)的巢式PCR(巢式PCR)检测方法,并制备了重组质粒pGem-T-S作为阳性对照标准品.检测限试验结果显示,该方法可以检测102拷贝的病毒粒子.而且与传染性造血器官坏死病毒、鲤春病毒、病毒性出血性败血症病毒、斑点叉尾(鱼回)病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、牙鲆弹状病毒以及锦鲤疱疹病毒等其他非蛙虹彩病毒无交叉反应.该体系具有简便、快速、敏感、特异性高、低成本等特点,为诊断与预防蛙虹彩病毒提供了一项重要的技术手段.

关 键 词:蛙虹彩病毒  中华鳖虹彩病毒  流行性造血器官坏死病毒  虎纹蛙虹彩病毒  巢式PCR
修稿时间:2011-05-09

Development of a nested PCR detection method for Ranavirus
ZHANG Min,LIN Xiangmei,JIANG Yuin. Development of a nested PCR detection method for Ranavirus[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2011, 18(3): 661-666. DOI: 10.3724/SP.J.1118.2011.00661
Authors:ZHANG Min  LIN Xiangmei  JIANG Yuin
Affiliation:The Institute of Animal and Plant Quarantine, Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100029
Abstract:
Keywords:Ranavirus   soft-shelled turtle iridovirus   epizootic haematopoietic necrosis virus   tiger frog virus   nested PCR
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