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蒙古绵羊体外受精胚胎干细胞建系培养研究
作者单位:;1.内蒙古大学教育部哺乳动物生殖生物学及生物技术重点实验室;2.内蒙古国际旅行卫生保健中心
摘    要:蒙古绵羊体外受精的胚胎干细胞(SESC)一直未能成功建系,确定一种适合的培养体系及传代方法对其成功建系有着重要的意义。本研究将获得的体外受精胚胎直接培养,以胎鼠成纤维细胞为饲养层,运用机械传代法传代,采用培养液Ⅰ和培养液Ⅱ两种不同的培养液培养绵羊胚胎干细胞。采用形态鉴定、碱性磷酸酶染色、类胚体形成,免疫荧光染色等方法对获得的SESC进行干细胞检测。结果显示:培养液Ⅰ和培养液Ⅱ都可用于SESC的培养,而无血清的培养液Ⅱ更利于细胞的生长;机械传代法适合于SESC的传代培养;冷冻复苏之后经过形态鉴定、碱性磷酸酶染色、体外分化以及免疫荧光染色,均与胚胎干细胞的形态特征一致。

关 键 词:绵羊  体外受精  胚胎干细胞  建系

Establishment of cultivation system for embryonic stem cell lines of in vitro fertilization embryos in Mongolia sheep
Abstract:
Keywords:
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