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鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达
引用本文:付峰,刘荭,范万红,江育林,黄倢. 鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达[J]. 海洋水产研究, 2007, 28(4): 72-76
作者姓名:付峰  刘荭  范万红  江育林  黄倢
作者单位:农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛,266071;烟台大学海洋学院,264005;深圳出入境检验检疫局动植食中心水生动物病重点实验室,518001;农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛,266071
基金项目:国家质量监督检验检疫总局科研项目 , 黄海水产研究所海水养殖生物疾病控制与分子病理学实验室开放课题
摘    要:根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物,在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT-PCR方法扩增该段糖蛋白基因,将所得的基因片段(517和521)克隆至穿梭载体pGAPZαA/B之GAP启动子下游位点,构建含α信号肽的重组表达载体。获得的重组质粒pGAPZαA-517和pGAPZαB-521经线性化后,电击法转化毕赤酵母SMD1168菌株,构建分泌型表达SVCV糖蛋白的重组酵母菌株。酵母菌落PCR法检测表明,已成功构建分泌表达SVCV糖蛋白的酵母基因工程菌株,斑点印迹法进一步分析表明有目的蛋白的成功表达。

关 键 词:鲤春病毒血症病毒  糖蛋白  克隆  毕赤酵母  分泌表达
文章编号:1000-7075(2007)04-0072-05
修稿时间:2006-06-092006-08-02

Clone and construction of the expression strain of Pichia pastoris for glycoprotein gene of spring viremia of carp virus
FU Feng,LIU Hong,FAN Wan-hong,JIANG Yu-lin,HUANG Jie. Clone and construction of the expression strain of Pichia pastoris for glycoprotein gene of spring viremia of carp virus[J]. Marine Fisheries Research, 2007, 28(4): 72-76
Authors:FU Feng  LIU Hong  FAN Wan-hong  JIANG Yu-lin  HUANG Jie
Abstract:
Keywords:Spring viremia of carp virus Glycoprotein Clone Pichia pastorisExpression
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