| PRRSV经典株和变异株RT-nPCR鉴别诊断方法的建立 |
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| 引用本文： | 朱小甫,吴旭锦. PRRSV经典株和变异株RT-nPCR鉴别诊断方法的建立[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2016, 44(1): 25-30 |
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| 作者姓名： | 朱小甫 吴旭锦 |
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| 作者单位： | 咸阳职业技术学院 畜牧兽医研究所 动物疫病分子生物学诊断实验室,咸阳职业技术学院 畜牧兽医研究所 动物疫病分子生物学诊断实验室 |
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| 基金项目： | 咸阳市科学技术研究发展计划项目（2014K02-21）；咸阳职业技术学院重点科研项目（2013KYA01） |
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| 摘 要： | 【目的】建立一种能够区分猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)经典株和变异株的RT-nPCR诊断方法,能够从病料组织、血清或精液中直接进行目的基因检测,达到快速诊断的目的。【方法】根据GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒基因序列,设计并合成了2对引物,通过改变不同的反应体系和反应条件,建立PRRSV经典株和变异株的RT-nPCR诊断方法,并通过灵敏性试验、特异性试验、病料组织和血清或精液样品检测,验证建立RT-nPCR方法的适用性。【结果】建立了PRRSV经典株和变异株的RT-nPCR诊断方法,该方法检测的cDNA含量极限为1.3×10-7 pg/μL;且仅能从PRRSV毒株中扩增到目的条带,从CH-1R经典株扩增出649bp条带,从SXXY/2013变异株扩增出562bp条带,电泳后能清晰区别,而从其他参考毒株中均不能扩增出目的条带。从48份疑似病料组织和血清中能直接检测出31份阳性结果。【结论】建立了一种灵敏度高、特异性好、可直接从病料组织和血清中快速鉴别PRRSV经典株和变异株的RT-nPCR方法。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征；经典株；变异株；诊断方法 |
| 收稿时间： | 2014-04-25 |
Establishment of a RT-nPCR diagnostic method for PRRSV classical and variant strains |
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| ZHU Xiao-fu and WU Xu-jin. Establishment of a RT-nPCR diagnostic method for PRRSV classical and variant strains[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2016, 44(1): 25-30 |
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| Authors: | ZHU Xiao-fu and WU Xu-jin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine reproductive and respiratory syndrome classical strains variant strain diagnostic methods |
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