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H3N2亚型SIV血凝蛋白单克隆抗体的制备
引用本文:周云飞,朱春平,李 燕,等. H3N2亚型SIV血凝蛋白单克隆抗体的制备[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2016, 44(1): 31-36
作者姓名:周云飞  朱春平  李 燕  
作者单位:河南农业大学 牧医工程学院,河南农业大学 牧医工程学院,河南农业大学 牧医工程学院
基金项目:国家农业科技成果转化资金项目(2012GB2D000273);河南省科技成果转化计划项目(122201110027)
摘    要:【目的】制备H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的单克隆抗体,为SIV的鉴别诊断奠定基础。【方法】将A/swine/Henan/1/2010(H3N2)猪流感病毒初步浓缩后,免疫6周龄的BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与瘤细胞NS0融合,采用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,对杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体进行Western blot检验和抗原结合活性检测。【结果】经过3次有限稀释法克隆纯化,最终得到1株能稳定分泌单克隆抗体的阳性细胞株,命名为1C10,经检测其腹水抗体效价为1∶51 200。单克隆抗体亚型鉴定结果表明,1C10为IgG1亚型,轻链类型为κ链。Western blot检测结果表明,这株单克隆抗体能与H3N2特异性结合,而且能特异性识别血凝素蛋白(HA),而不与H1N1亚型猪流感病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒发生交叉反应。【结论】制备获得1株抗猪流感H3N2病毒HA蛋白的单克隆抗体,可用于猪流感病毒鉴别诊断方法的建立。

关 键 词:H3N2;猪流感病毒;单克隆抗体
收稿时间:2014-04-04

Preparation of monoclonal antibody for H3N2 subtype swine influenza virus hemagglutinin protein
ZHOU Yun-fei,ZHU Chun-ping and LI Yan,et al. Preparation of monoclonal antibody for H3N2 subtype swine influenza virus hemagglutinin protein[J]. Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition), 2016, 44(1): 31-36
Authors:ZHOU Yun-fei  ZHU Chun-ping  LI Yan  et al
Abstract:
Keywords:H3N2  swine influenza virus  monoclonal antibody
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