| 真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定条件的优化 |
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| 引用本文： | 马 鑫,高 卉,张俊会,等. 真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定条件的优化[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2016, 44(1): 155-161，176 |
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| 作者姓名： | 马 鑫 高 卉 张俊会 等 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 资源环境学院,西北农林科技大学 资源环境学院,西北农林科技大学 资源环境学院 |
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| 基金项目： | 陕西博秦生物工程有限公司微生物增油项目 |
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| 摘 要： | 【目的】探究酶液制备及测定条件对真菌粗酶制剂脱氢酶活性的影响,确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定方法。【方法】采用氯化三苯基四氮唑(TTC)还原法测定真菌粗酶制剂的脱氢酶活性,分析粗酶制剂与去离子水质量比、活化时间、活化温度、振荡速率、搅拌时间、固液分离方法、活化剂种类、过滤介质及显色时间对脱氢酶活性的影响。【结果】1真菌粗酶制剂活化、分离方式及显色时间对真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定有明显影响。2确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定优化方法为:将粗酶制剂与去离子水按照质量比1∶40装入三角瓶,在28℃、120r/min恒温摇床中振荡15h,用快速滤纸过滤获得酶液;将酶液与TTC-葡萄糖溶液混匀,在40℃恒温水浴锅中反应显色,待反应液出现红色后计时,维持90min完成显色反应,取出后加乙酸乙酯充分摇匀,4℃冰箱中静置5~6h,取上层澄清有机相在波长485nm比色,根据标准曲线计算脱氢酶活性。【结论】获得了测定真菌粗酶制剂脱氢酶活性的测定方法。
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| 关 键 词： | TTC还原法；脱氢酶；真菌；粗酶制剂 |
| 收稿时间： | 2014-05-09 |
Optimization of determination method for dehydrogenase activity of crude enzyme preparation from fungi |
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| MA Xin,GAO Hui and ZHANG Jun-hui,et al. Optimization of determination method for dehydrogenase activity of crude enzyme preparation from fungi[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2016, 44(1): 155-161，176 |
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| Authors: | MA Xin GAO Hui ZHANG Jun-hui et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TTC-reduction method dehydrogenase fungi crude enzyme preparation |
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