| 中国林蛙抗菌肽Temporin-1 CEa基因的真核表达载体构建 |
| |
| 引用本文： | 张志崇,王春生,张秋婷,朴善花,苗向阳,安铁洙.中国林蛙抗菌肽Temporin-1 CEa基因的真核表达载体构建[J].经济动物学报,2012,16(1):26-30. |
| |
| 作者姓名： | 张志崇 王春生 张秋婷 朴善花 苗向阳 安铁洙 |
| |
| 作者单位： | 1. 东北林业大学生命科学学院,哈尔滨,150040
2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193 |
| |
| 基金项目： | 国家转基因生物新品种培育科技重大专项，国家自然科学基金资助项目 |
| |
| 摘 要： | 为了建立大量获取中国林蛙抗菌肽的方法,根据GenBank中的中国林蛙皮肤抗菌肽Temporin-1CEa基因的mRNA序列(EU624139)设计一对特异性引物,以提取的中国林蛙皮肤总RNA反转录出的cDNA为模板,将扩增的编码序列与pEASY-T3克隆载体连接获得Tem-T3;利用酶切、连接等分子生物学手段,将GFP基因连入Tem-T3克隆载体,再经酶切获得Tem-GFP片段,并插入真核表达载体pcDNA3.1,最终得到Tem-GFP-pcD-NA3.1重组质粒;利用脂质体转染法将该质粒转入绵羊成纤维细胞,48 h后可在荧光倒置显微镜下观察到GFP的绿色荧光表达;qPCR数据分析显示,与对照组相比,转染Tem-GFP-pcDNA3.1的绵羊成纤维细胞中融合蛋白Tem-GFP的表达量可提高约300倍。本研究为构建Temporin-1CEa基因山羊乳腺特异表达载体提供依据。
|
| 关 键 词： | 中国林蛙 抗菌肽 绵羊成纤维细胞 瞬时表达 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector with Rana Antimicrobial Peptides Gene Temporin-lCEa |
| |
| ZHANG Zhi-chong,WANG Chun-sheng,ZHANG Qiu-ting,PIAO Shan-hua,MIAO Xiang-yang,AN Tie-zhu.Construction of Eukaryotic Expression Vector with Rana Antimicrobial Peptides Gene Temporin-lCEa[J].Journal of Economic Animal,2012,16(1):26-30. |
| |
| Authors: | ZHANG Zhi-chong WANG Chun-sheng ZHANG Qiu-ting PIAO Shan-hua MIAO Xiang-yang AN Tie-zhu |
| |
| Institution: | 1(1.College of Life Science,Northeast Forestry University,Harbin 150040,China;2.Institute of Animal Sciences,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Rana chensinensis antimicrobial peptide sheep fibroblast cell transient expression activityanalysis |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
