不同苹果品种抗苹果绵蚜的漆酶基因表达模式及其原核表达载体筛选 |
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作者姓名: | 李慧芳 滕子文 范银君 李津洋 万方浩 周忠实 周洪旭 |
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作者单位: | 1. 青岛农业大学植物医学学院·山东省环境友好型农业有害生物防治工程技术研究中心·山东省生物入侵与生态安全高校特色实验室·中澳农业与环境健康联合研究院;2. 中国农业科学院深圳农业基因组研究所;3. 中国农业科学院植物保护研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(32172395); |
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摘 要: | 【目的】明确不同苹果品种漆酶基因在抗苹果绵蚜过程中的差异表达模式,探索原核表达苹果漆酶蛋白的方法与条件。【方法】基于转录组测序分析抗蚜品种新红星(Starkrimson)、小国光(Ralls Genet)与感蚜品种红富士(Red Fuji)3个苹果品种被苹果绵蚜为害0 h、12 h、5 d后漆酶基因的表达模式,筛选抗蚜候选漆酶基因;选择pET-28a(+)、pET-32a(+)、pGEX-TEV、pHAT2 4种载体,对4个漆酶基因MdLac23、MdLac6、MdLac7、MdLac2进行原核表达,对表达产物进行Western-Blot验证,镍柱亲和层析纯化,以ABTS为底物分析其酶活性。【结果】与对照相比,不同苹果品种被害12 h、5 d后,苹果枝条中漆酶差异表达基因数量为27个。不同苹果品种的漆酶基因表达模式存在差异,抗蚜品种新红星及小国光漆酶差异表达基因上调表达居多,感蚜品种红富士下调表达居多,新红星12个基因上调表达,无下调表达基因;小国光9个基因上调表达,3个基因下调表达;红富士10个基因下调表达,4个基因上调表达。其中新红星特有的上调表达基因数量为6个,小国光特有的上调表...
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关 键 词: | 苹果绵蚜 苹果品种 漆酶 原核表达 抗虫防御 |
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