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梨花药愈伤组织诱导和悬浮培养体系的建立及应用
引用本文:庄梦弟,李涛,辛骞祎,周梦瑶,张海霞,马辉,钱稷,张玉星,亓宝秀,许建锋.梨花药愈伤组织诱导和悬浮培养体系的建立及应用[J].果树学报,2023(3):577-587.
作者姓名:庄梦弟  李涛  辛骞祎  周梦瑶  张海霞  马辉  钱稷  张玉星  亓宝秀  许建锋
作者单位:1. 河北农业大学园艺学院;3. 英国利物浦约翰摩尔大学药学和分子生物学学院
基金项目:国家重点研发计划(2019YFD1001404-5);;河北省现代农业产业技术体系梨创新团队项目(HBCT2018100202);
摘    要:【目的】建立梨悬浮细胞体系,并利用悬浮细胞体系获得高质量悬浮细胞,进行遗传转化和原生质体的分离。【方法】以新梨7号花药为试材,诱导获得梨花药愈伤组织,研究了细胞悬浮系建立和影响悬浮细胞增殖的主要因子。【结果】花药在1/2 MS+1.0 mg·L-12,4-D+0.4 mg·L-1NAA+30 g·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂(pH值为5.8~6.0)培养基上诱导的愈伤组织,经4~5次继代得到了黄白色、颗粒状,状态相对较好的愈伤组织;将愈伤组织接种于液体培养基中,于28℃,200 r·min-1的黑暗条件下悬浮振荡培养,经4~5次悬浮继代培养建立了悬浮细胞系,适宜的启动和增殖培养基为:MS+1.5 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+30 g·L-1蔗糖,细胞生长曲线呈“S”型,活细胞率达81.98%,近圆细胞率达83.66%,可作为遗传转化的受体,转化率为20.00%。也可直接用于原生质体的分...

关 键 词:  愈伤组织  细胞悬浮培养  生长曲线
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