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| 稳定表达T7 RNAP的BHK-21细胞系的建立 | |
| 引用本文： | 李欣,杨少华,王洪梅,刘晓,武建明,高运东,王立群,仲跻峰,何洪彬.稳定表达T7 RNAP的BHK-21细胞系的建立[J].中国预防兽医学报,2010,32(6). |
| 作者姓名： | 李欣 杨少华 王洪梅 刘晓 武建明 高运东 王立群 仲跻峰 何洪彬 |
| 作者单位： | 1. 山东省农业科学院,奶牛研究中心,山东,济南,250100;东北农业大学,生命科学学院,黑龙江,哈尔滨,150030 2. 山东省农业科学院,奶牛研究中心,山东,济南,250100 3. 东北农业大学,生命科学学院,黑龙江,哈尔滨,150030 |
| 基金项目： | 国家转基因重大专项，山东省自然科学基金，山东农科院"杰出人才"基金，山东省农业重大应用技术创新课题，山东省科技攻关项目 |
| 摘 要： | 为建立能稳定表达T7RNA聚合酶(T7RNAP)的BHK-21细胞系以研究RNA重组疫苗,本研究从BL21(DE3)大肠杆菌中扩增T7 RNAP基因,定向克隆于质粒pcDNA3.1(+)中,经双酶切及测序鉴定,获得阳性重组质粒pcDNA3.1-T7 RNAP。用该质粒转染BHK-21细胞,经G418筛选14d后获得阳性细胞株。RT-PCR和western blot检测结果表明,建立了稳定表达T7 RNAP的BHK-21细胞系,并且在不同代次的阳性细胞中能稳定表达目的基因和蛋白,该研究为RNA病毒感染性质粒在细胞内转录及病毒拯救技术平台的建立奠定了基础。 |
| 关 键 词： | BHK-21细胞 |
Establishment of BHK-21 cell lines stably expressing T7 RNAP |
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| LI Xin,YANG Shao-hua,WANG Hong-mei,LIU Xiao,WU Jian-ming,GAO Yun-dong,WANG Li-qun,ZHONG Ji-feng,HE Hong-bin.Establishment of BHK-21 cell lines stably expressing T7 RNAP[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(6). | |
| Authors: | LI Xin YANG Shao-hua WANG Hong-mei LIU Xiao WU Jian-ming GAO Yun-dong WANG Li-qun ZHONG Ji-feng HE Hong-bin |
| Abstract: | |
| Keywords: | T7 RNAP |
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