极细链格孢菌蛋白激发子Peat1在酵母双杂交系统中转录激活活性检测 |
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引用本文: | 刘延锋,邱德文,曾洪梅,杨秀芬.极细链格孢菌蛋白激发子Peat1在酵母双杂交系统中转录激活活性检测[J].安徽农业科学,2008,36(20). |
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作者姓名: | 刘延锋 邱德文 曾洪梅 杨秀芬 |
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作者单位: | 中国农业科学院植物保护研究所,北京,100081;中国农业科学院植物保护研究所,北京,100081;中国农业科学院植物保护研究所,北京,100081;中国农业科学院植物保护研究所,北京,100081 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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摘 要: | 以PCR法从pGEX-6p-1-peaT1中扩增出peaT1基因片段,电泳回收后将peaT1基因定向克隆到plexA载体中。将诱饵载体plexA-peaT1经酶切和测序鉴定后,用PEG/LiAC法转化酵母EGY48p8op-lacZ],并进行诱饵载体转录激活活性检测。结果表明,重组质粒经EcoR I和XhoⅠ双酶切后,琼脂糖凝胶电泳检测可见2条与预期相符的条带,表明诱饵载体构建成功。β-半乳糖苷酶活性分析表明,诱饵载体plexA-peat1无转录激活活性,对酵母菌株也无毒害作用。该诱饵载体可用于酵母双杂交系统中,为下一步筛选cDNA文库奠定了基础。
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关 键 词: | Peat1 酵母双杂交 转录激活活性 |
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