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猪细环病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及应用
引用本文:杨春华,周延,孙思扬,钟毅,王川庆.猪细环病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及应用[J].畜牧兽医学报,2012,43(9):1422-1428.
作者姓名:杨春华  周延  孙思扬  钟毅  王川庆
作者单位:1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;江西出入境检验检疫局,南昌330002
2. 江西出入境检验检疫局,南昌330002;南昌大学,南昌330002
3. 江西出入境检验检疫局,南昌,330002
4. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002
基金项目:国家质检总局科技计划项目
摘    要:为了应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测猪细环病毒1型和2型,根据猪细环病毒的序列特点设计特异性引物,PCR扩增产物经DHPLC技术进行快速检测。选择猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和重复性;用质粒标准品进行TTSuV1和TTSuV2的PCR-DHPLC检测,灵敏度可达1.0×101拷贝·μL-1。对80份血清样本分别应用实时荧光PCR法、PCR-凝胶电泳法及本文所建立的PCR-DHPLC法与进行检测,发现TTSuV1有63份PCR-DHPLC阳性,63份实时荧光PCR阳性,54份PCR-凝胶电泳阳性;TTSuV2有69份PCR-DHPLC阳性,69份实时荧光PCR阳性,56份PCR-凝胶电泳阳性。本试验建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于TTSuV感染的分子流行病学调查。

关 键 词:猪细环病毒  变性高效液相色谱  实时荧光PCR  PCR

Development and Application of PCR-DHPLC Assays for Detection of the Swine Torque Teno Sus Virus
YANG Chun-hua , ZHOU Yan , SUN Si-yang , ZHONG Yi , WANG Chuan-qing.Development and Application of PCR-DHPLC Assays for Detection of the Swine Torque Teno Sus Virus[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2012,43(9):1422-1428.
Authors:YANG Chun-hua  ZHOU Yan  SUN Si-yang  ZHONG Yi  WANG Chuan-qing
Institution:1(1.College of Animal Science and Veterinary Medicine,Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002,China;2.Jiangxi Entry-Exit Inspection & Quarantine Bureau of P.R.China, Nanchang 330002,China;3.Nanchang University,Nanchang 330002,China)
Abstract:
Keywords:
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