| SYBR Green实时荧光PCR快速鉴定辣椒实蝇 |
| |
| 引用本文： | 余道坚,章桂明,陈志粦,康林,杨伟东.SYBR Green实时荧光PCR快速鉴定辣椒实蝇[J].植物检疫,2006,20(1):10-14. |
| |
| 作者姓名： | 余道坚 章桂明 陈志粦 康林 杨伟东 |
| |
| 作者单位： | 深圳出入境检验检疫局,518001 |
| |
| 摘 要： | 本文应用SYBRGreen实时荧光PCR技术,建立了SYBRGreen实时荧光PCR快速鉴定辣椒实蝇的方法。利用辣椒实蝇mtDNACOI基因序列,筛选出种特异引物lati1/lati2。引物的特异性分别用辣椒实蝇、橘小实蝇、木瓜实蝇、杨桃实蝇、菲律宾实蝇、芒果实蝇、番石榴实蝇、瓜实蝇和南瓜实蝇等9种果实蝇来验证。0.01ng,0.1ng,1ng,10ng,20ng,40ng和100ng等7个不同浓度系列的辣椒实蝇DNA模板用来检测SYBRGreenPCR实时荧光反应的灵敏度,结果表明,SYBRGreenPCR的检测限度达1pg以下,最适模板DNA浓度为1～20ng。成虫、幼虫和蛹等3种不同虫态的辣椒实蝇有一致的扩增曲线,熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳分别用来确认实时荧光PCR产物的特异性。其平均熔解温度为77.5℃±0.1℃。获得1段长为366bp的特异性目标片段,说明在辣椒实蝇成虫为模板基础上建立的SYBRGreen实时荧光PCR方法适于幼虫、蛹的快速鉴定。
|
| 关 键 词： | 辣椒实蝇 实时荧光PCR 熔解曲线 快速鉴定 |
| 收稿时间： | 2005-04-03 |
| 修稿时间： | 2005-04-032005-09-10 |
Rapid identification of Bactrocera latifrons by real-time PCR using SYBR Green chemistry |
| |
| Yu Daojian,Zhang Guiming,Chen Zhilin,Kang Lin,Yang Weidong.Rapid identification of Bactrocera latifrons by real-time PCR using SYBR Green chemistry[J].Plant Quarantine,2006,20(1):10-14. |
| |
| Authors: | Yu Daojian Zhang Guiming Chen Zhilin Kang Lin Yang Weidong |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | SYBR Green |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
