| 东方蜜蜂ISSR反应体系的建立及优化 |
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| 引用本文： | 谭宏伟,张夏,董霞,李听安. 东方蜜蜂ISSR反应体系的建立及优化[J]. 蜜蜂杂志, 2009, 29(9): 12-15 |
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| 作者姓名： | 谭宏伟 张夏 董霞 李听安 |
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| 作者单位： | 云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南,昆明,650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南,昆明,650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南,昆明,650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南,昆明,650201 |
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| 基金项目： | 云南省自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 以东方蜜蜂(Apis cerana)为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如模版DNA、Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物的浓度及退火温度进行了研究.确立了适合东方蜜蜂ISSR扩增的反应体系:25IX L反应体系中最适含量为:10×PCR buffer 2.5μL,2.5mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,1UTaqDNA聚合酶,0.4 pmol/μL引物,20～40 ng模板DNA.PCR反应程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,52.3℃(引物UBC811优化后的退火温度,退火温度随引物不同而定)退火30 s,72℃延伸30 s,35个循环,72℃再延伸5 min,在4℃保存.优化体系的建立为进一步利用ISSR分子标记技术进行东方蜜蜂遗传多样性研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 东方蜜蜂 简单序列重复间区(ISSR) PCR反应体系 优化 |
Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Apis cerana |
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| TAN Hong-wei,ZHANG Xia,DONG Xia,LI Ting-an. Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Apis cerana[J]. Journal of Bee, 2009, 29(9): 12-15 |
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| Authors: | TAN Hong-wei ZHANG Xia DONG Xia LI Ting-an |
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| Affiliation: | Eastern Bee Research Institute;Yunnan Agricultural University;Kunming 650201;China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Apis cerana ISSR PCR reaction system Optimization |
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