| 猪伪狂犬病毒TK缺失株PRV/TK~-的构建及其生物学特性 |
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| 引用本文： | 陈瑞爱,邵定勇,韩静芳.猪伪狂犬病毒TK缺失株PRV/TK~-的构建及其生物学特性[J].中国兽医学报,2010,30(5). |
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| 作者姓名： | 陈瑞爱 邵定勇 韩静芳 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业大学生物学院,北京100083;广东大华农动物保健品股份有限公司,广东,新兴,527400
2. 广东大华农动物保健品股份有限公司,广东,新兴,527400 |
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| 基金项目： | 广东省高新技术产业基金资助项目(2006B16102019) |
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| 摘 要： | 为了构建伪狂犬病毒容A株(PRV-Ra)TK基因缺失重组病毒,本研究利用PCR从PRV-Ra株基因组分别扩增TK基因两侧的序列LTK和RTK,将LTK和RTK克隆到pUC19载体,构建转移质粒pUC19-TK/HEK。进一步将增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)表达盒克隆到pUC19-TK/HEK质粒中,构建转移质粒pUC19-TK/EGFP。用pUC19-TK/EGFP与PRV-Ra株基因组共转染BHK21细胞,通过噬斑纯化获得重组病毒PRV/TK-/EGFP;用pUC19-TK/HEK与PRV/TK-/EGFP病毒基因组共转染BHK21细胞,噬斑纯化获得不含EGFP基因的重组病毒PRV/TK-。该重组病毒在体外传30代后仍其有良好的遗传稳定性;PRV/TK-体外增殖速度、对家兔的毒力以及对仔猪的安全性和抗体反应性研究表明,重组毒株与原始株(PRV-Ra)在BHK21上具有相似的增殖规律;PRV/TK-对家兔的毒力比PRV-Ra下降了10000倍;以105.0TCID50PRV/TK-免疫小猪后4周,体内产生的平均中和抗体水平达101.9,略高于对照疫苗产生的抗体水平(101.8)。本试验为PRV基因功能的研...
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| 关 键 词： | 伪狂犬病毒容A株 TK缺失 生物学特性 |
Construction and biological characteristics of TK-null recombinant pseudorabies virus |
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| CHEN Rui-ai,SHAO Ding-yong,HAN Jing-fang.Construction and biological characteristics of TK-null recombinant pseudorabies virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(5). |
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| Authors: | CHEN Rui-ai SHAO Ding-yong HAN Jing-fang |
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| Institution: | CHEN Rui-ai1,2,SHAO Ding-yong 2,HAN Jing-fang2 (1.College of Biological Sciences,China Agricultural University,Beijing 100083,China,2.Guangdong Dahuanong Animal Health Products Limited Liability Company,Xinxing,Guangdong 527400,China) |
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| Abstract: | To construct TK-null recombinant pseudorabies virus (PRV)Ra strain as a techonolgial support of the research of genetic engineering vaccine and gene function of pseudorabies virus.Transfer vector pUC19-TK/HEK was constructed using both ends of PRV TK gene,which were successfully amplified by PCR from PRV-Ra genome.Subsequently enhanced green fluorescent protein gene (EGFP) expression box was cloned into pUC19-TK/HEK,resulting a universal transfer vector pUC19-TK/EGFP.Co-transfecting pUC19-TK/EGFP and genome... |
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| Keywords: | PRV Ra strain TK-null biological characterization |
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