新孢子虫NcGRA2基因真核表达质粒的构建及其在293细胞内的表达 |
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引用本文: | 金春梅,朱慧敏,于龙政,张守发. 新孢子虫NcGRA2基因真核表达质粒的构建及其在293细胞内的表达[J]. 安徽农业科学, 2015, 0(6): 147-148. DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2015.06.054 |
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作者姓名: | 金春梅 朱慧敏 于龙政 张守发 |
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作者单位: | 延边大学农学院动物医学系,吉林延吉,133002 |
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基金项目: | 吉林省现代农业产业技术体系建设专项(201327) |
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摘 要: | [目的]为了构建新孢子虫NcGRA2基因的真核表达载体,探讨重组载体在体外细胞的表达.[方法]从含有NcGRA2基因的重组质粒pGEX-4T1-NcGRA2中,用限制性内切酶进行酶切获得带有粘性末端的NcGRA2基因片段.经琼脂糖凝胶电泳切胶回收NcGRA2基因片段,与pcDNA3.1载体连接.将构建的真核表达质粒pcDNA3.1-NcGRA2转染到293细胞中表达.[结果]经酶切分析和序列测定,证实了重组质粒的正确连接.经免疫荧光抗体试验验证pcDNA3.1-NcGRA2能在293细胞中表达NcGRA2蛋白.[结论]获得重组质粒pcDNA3.1-NcGRA2,并能在体外细胞中表达NcGRA2蛋白,为进一步研究核酸疫苗的动物免疫试验奠定了基础.
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关 键 词: | 新孢子虫 NcGRA2 真核表达 |
Eukaryocyte Vector Construction and Expression in 293 Cell of NcGRA2 Genes |
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Affiliation: | JIN Chun-mei;ZHU Hui-min;YU Long-zheng;Department of Veterinary Medicine,Yanbian University; |
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Abstract: | |
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Keywords: | Neospora caninum NcGRA2 Eukaryocyte vector |
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