小鹅瘟病毒PCR检测条件的优化

为了提高小鹅瘟病毒PCR检测的检出率,试验根据现有的小鹅瘟病毒基因序列,设计合成了1对特异性引物,以实验室中保存的小鹅瘟病料DNA为模板,对反应程序中的延伸时间、退火温度等循环参数进行优化,并进行了敏感性和特异性检测。结果表明:优化后的延伸时间为45 s,退火温度为48.0℃;优化后的方法对小鹅瘟病毒可扩增出大小为550 bp的特异性条带,对照毒株扩增结果均为阴性,其灵敏度为146.00 pg/μL。说明优化后的PCR方法特异性强、敏感性高,反应时间明显缩短。