| 传染性造血器官坏死病病毒CJ-13株糖蛋白的原核表达及免疫原性 |
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| 引用本文： | 吉尚雷,张培军,卢玉婷,等. 传染性造血器官坏死病病毒CJ-13株糖蛋白的原核表达及免疫原性[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2015, 43(7): 1-6,14 |
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| 作者姓名： | 吉尚雷 张培军 卢玉婷 等 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学 动物科技学院,吉林省卫生监测检验中心,吉林农业大学 动物科技学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30972191)；农业部948项目(2014Z34)；长春市科技计划资助项目(2014223) |
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| 摘 要： | 【目的】克隆传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)CJ-13株糖蛋白(G蛋白)基因,构建原核表达载体,并检测其在大肠杆菌BL21中的表达情况,为IHNV诊断试剂盒和疫苗的研制奠定基础。【方法】设计1对G基因特异引物对G基因进行RT-PCR扩增,将扩增产物克隆到pGEM-T Easy载体上,构建重组质粒pGEM-T Easy-G,经双酶切鉴定、核苷酸序列分析后,将G基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,构建传染性造血器官坏死病病毒G基因原核表达质粒pET-32a-G,转化至宿主菌BL21中,诱导表达目的蛋白,采用SDS-PAGE、Western blot和ELISA等方法对表达产物进行分析。【结果】成功克隆了IHNV G蛋白基因,该基因长度为1 527bp。成功构建了原核表达质粒pET-32a-G,诱导表达出约76ku的产物,与预期分子质量大小相符。Western blot分析结果显示,所表达的G蛋白能够被小鼠抗IHNV血清识别。间接ELISA结果显示,小鼠抗G蛋白血清能够识别IHNV全病毒。【结论】成功构建了IHNV G蛋白原核表达系统,重组G蛋白具有良好的反应原性和免疫原性。
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| 关 键 词： | 传染性造血器官坏死病病毒；G蛋白；原核表达；免疫原性 |
| 收稿时间： | 2014-01-17 |
Prokaryotic expression and immunogenicity of glycoprotein gene of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) CJ-13 strain |
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| JI Shang-lei,ZHANG Pei-jun and LU Yu-ting,et al. Prokaryotic expression and immunogenicity of glycoprotein gene of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) CJ-13 strain[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2015, 43(7): 1-6,14 |
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| Authors: | JI Shang-lei ZHANG Pei-jun LU Yu-ting et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) G protein prokaryotic expression immunogenicity |
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