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| 鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库的构建及鉴定 | |
| 引用本文： | 张改平,朱礼倩,杨艳艳,赵绪永,乔松林,张红,王丽,李清州,王选年. 鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库的构建及鉴定[J]. 中国预防兽医学报, 2008, 30(3): 216-219 |
| 作者姓名： | 张改平 朱礼倩 杨艳艳 赵绪永 乔松林 张红 王丽 李清州 王选年 |
| 作者单位： | 1. 河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002 2. 河南农业大学,河南,郑州,450002 3. 河南教育学院,河南,郑州,450002 4. 河南科技学院,河南,新乡,453003 |
| 摘 要： | 为构建鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库并对文库质量进行鉴定,从鸡胚成纤维细胞中直接提取mRNA,用紫外分光光度计测定含量.经电泳确定mRNA的质量,反转录合成第一、二链cDNA,经苯酚氯仿抽提后与EcoR Ⅰ接头连接,经Not Ⅰ酶切后用spin column除去小于500 bp的cDNA片段,与经EcoR Ⅰ和Not Ⅰ双酶切的真核表达质粒连接,连接产物电转化感受态细胞,测定文库的容量大小并通过colony PCR鉴定插入cDNA片段的大小.构建成含8.8×105个重组子的鸡胚成纤维细胞cDNA文库,重组子中平均插入外源片段长度大于1.0 kb的约占85.7%.从结果看构建的文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆. |
| 关 键 词： | 鸡胚成纤维细胞 cDNA表达文库 传染性法氏囊病毒受体 鸡胚成纤维细胞 真核表达质粒 表达文库 chicken library eukaryotic expression identification 克隆 筛选 结果 长度 重组子 大小 容量 测定 感受态细胞 电转化 接头连接 双酶切 spin |
| 文章编号： | 1008-0589（2008）03-0216-04 |
| 收稿时间： | 2007-09-20 |
| 修稿时间： | 2007-09-20 |
Construction and identification of a cDNA eukaryotic expression library of chicken embryo-fibroblasts |
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| ZHANG Gai-ping,ZHU Li-qian,YANG Yan-yan,ZHAO Xu-yong,QIAO Song-lin,ZHANG Hong,WANG Li,LI Qing-zhou,WANG Xuan-nian. Construction and identification of a cDNA eukaryotic expression library of chicken embryo-fibroblasts[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2008, 30(3): 216-219 | |
| Authors: | ZHANG Gai-ping ZHU Li-qian YANG Yan-yan ZHAO Xu-yong QIAO Song-lin ZHANG Hong WANG Li LI Qing-zhou WANG Xuan-nian |
| Abstract: | |
| Keywords: | chicken embryo-fibroblast cDNA eukaryotic expression library infectious bursal disease virus |
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