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以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒
引用本文:马恢,谢晓亮,尹江,温春秀,吴志明.以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒[J].园艺学报,2007,34(5):1213-1216.
作者姓名:马恢  谢晓亮  尹江  温春秀  吴志明
作者单位:(河北省高寒作物研究所,河北张家口 076450;河北省农林科学院经济作物研究所,石家庄 050051)
摘    要: 根据马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计特异引物,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行PSTVd检测研究。为避免由于提取的RNA降解或者RT-PCR反应质量不高所造成的假阴性问题,在检测过程中引入马铃薯线粒体NADH脱氢酶ND2亚基基因mRNA为内对照,该内对照的一个引物跨越了该基因内含子区域,只对剪接后的mRNA进行特异扩增而不扩增其本身DNA。利用内对照引物和PSTVd特异引物进行双重RT-PCR检测,分别扩增出190 bp的内对照基因特异片段和360 bp的PSTVd特异条带,与预期引物设计大小一致。引入的内对照可以较好地监控PSTVd的RT-PCR检测过程。

关 键 词:马铃薯  马铃薯纺锤块茎类病毒  双重RT-PCR  马铃薯线粒体NADH  ND2  mRNA
文章编号:0513-353X(2007)05-1213-04
修稿时间:2007-07-24

Duplex RT-PCR Detection of Potato spindle tuber viroid with an Internal Control of Potato ND2 mRNA
MA Hui,XIE Xiao-liang,YIN Jiang,WEN Chun-xiu,WU Zhi-ming.Duplex RT-PCR Detection of Potato spindle tuber viroid with an Internal Control of Potato ND2 mRNA[J].Acta Horticulturae Sinica,2007,34(5):1213-1216.
Authors:MA Hui  XIE Xiao-liang  YIN Jiang  WEN Chun-xiu  WU Zhi-ming
Institution:( Zhangjiakou High-land and Cold Crop Research Institute, Zhangjiakou, Hebei 076450, China;Institute of Economic Crop Research, Hebei Academy of Agricultural and Forestry Sciences, Shijiazhuang 050051,China)
Abstract:
Keywords:Potato  Potato spindle tuber viroid  Duplex RT-PCR  Potato NADH ND2 subunit mRNA
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