苜蓿根腐病菌(Fusarium solani)的LAMP快速检测方法 |
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引用本文: | 兰成忠,阮宏春,甘林,代玉立,卢学松. 苜蓿根腐病菌(Fusarium solani)的LAMP快速检测方法[J]. 江西农业学报, 2020, 32(1): 27-32 |
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作者姓名: | 兰成忠 阮宏春 甘林 代玉立 卢学松 |
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作者单位: | 福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省农业科学院 植物保护研究所,福建 福州 350013;福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省农业科学院 植物保护研究所,福建 福州 350013;福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省农业科学院 植物保护研究所,福建 福州 350013;福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省农业科学院 植物保护研究所,福建 福州 350013;福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省农业科学院 植物保护研究所,福建 福州 350013 |
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基金项目: | 福建省公益科研院所科研专项;福建省农科院青年科技英才百人计划;福建省自然科学基金 |
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摘 要: | 通过比较茄镰刀菌(Fusarium solani)与其近缘种之间的TEF-1α(translation elongation factor-1 alpha)基因序列差异,设计并筛选出一套对茄镰刀菌具有种特异性的LAMP引物,建立了检测苜蓿根腐病菌的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术体系,并进行了特异性和灵敏度验证。该方法在64℃等温条件下进行核酸扩增反应60 min,即可肉眼根据反应液颜色变化判定扩增产物。在特异性实验中,仅茄镰刀菌的DNA在检测后呈绿色的阳性反应,而其它供试菌株的DNA均呈橙色的阴性反应。该方法对目标病菌DNA的最低检测限为10 fg/μL,同时还可检测出苜蓿发病组织中的目标菌,因此,该方法具有快速、准确和灵敏的优点。
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关 键 词: | 苜蓿 根腐病 茄镰刀菌 TEF-1α基因 LAMP检测 |
Rapid Detection Method for Fusarium solani by Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP) |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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