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猪肌肉生长抑制素基因的克隆及原核表达
引用本文:鲍淑青,张克英,陈代文,龙定彪. 猪肌肉生长抑制素基因的克隆及原核表达[J]. 动物营养学报, 2007, 19(5): 617-621
作者姓名:鲍淑青  张克英  陈代文  龙定彪
作者单位:四川农业大学动物营养研究所,雅安,625014;四川农业大学动物营养研究所,雅安,625014;四川农业大学动物营养研究所,雅安,625014;四川农业大学动物营养研究所,雅安,625014
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:本试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。根据基因库肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点及保护碱基,提取汉普夏猪的骨骼肌总RNA,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,克隆到pET-30a( )中,构建原核表达载体pET-30a-M,将重组表达质粒转化至E.coliBL21(DE3)中,诱导表达。结果表明,成功扩增出肌肉生长抑制素全长基因;克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与国外报道的完全一致;成功构建原核表达载体pET-30a-M;经IPTG诱导,表达出了6×His-M融合蛋白,用组氨酸标签抗体做Western印记证明产物大约48 ku,与预期大小相符,肌肉生长抑制素蛋白在大肠杆菌中成功的进行了表达。

关 键 词:肌肉生长抑制素  克隆  原核表达  纯化
修稿时间:2007-03-23

Cloning and Prokaryotic Expression of Porcine Myostatin Gene
BAO Shu-qing,ZHANG Ke-ying,CHEN Dai-wen,LONG Ding-biao. Cloning and Prokaryotic Expression of Porcine Myostatin Gene[J]. CHINESE JOURNAL OF ANIMAL NUTRITION, 2007, 19(5): 617-621
Authors:BAO Shu-qing  ZHANG Ke-ying  CHEN Dai-wen  LONG Ding-biao
Abstract:
Keywords:Myostati  Cloning  Prokaryotic expression  Purification
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