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表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒VP1蛋白重组腺病毒的构建
引用本文:殷秀辰,刘红玉,陈玉环,刘明,张云.表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒VP1蛋白重组腺病毒的构建[J].中国预防兽医学报,2013,35(7).
作者姓名:殷秀辰  刘红玉  陈玉环  刘明  张云
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨,150001
2. 东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨,150030
基金项目:现代农业水禽产业技术体系岗位科学家专项
摘    要:为构建表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-I)VP1蛋白的重组腺病毒,本实验采用RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ HP-1株VP1基因,克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,并将其电转化于含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中,通过同源重组制备含有重组腺病毒的质粒.重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞,获得重组腺病毒(rAd-VP1).间接免疫荧光和western blot鉴定结果显示,DHV-Ⅰ的VP1蛋白在重组腺病毒感染的AD293中获得表达.rAd-VP1的制备为鸭免疫实验效果评价奠定了基础.

关 键 词:重组腺病毒  Ⅰ型鸭病毒性肝炎  VP1蛋白
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