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鸭源鸡杆菌双重PCR检测方法的初步建立
引用本文:皇甫和平,杨霞,赵军,王川庆,陈陆,常洪涛,王新卫,刘红英,姚慧霞.鸭源鸡杆菌双重PCR检测方法的初步建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(8).
作者姓名:皇甫和平  杨霞  赵军  王川庆  陈陆  常洪涛  王新卫  刘红英  姚慧霞
作者单位:1. 河南农业大学禽病研究所,河南郑州450002;郑州牧业工程高等专科学校,河南郑州450011
2. 河南农业大学禽病研究所,河南郑州,450002
基金项目:柏林格公司,国家自然科学基金
摘    要:为建立鸭源鸡杆菌(G.anatis)双重PCR检测方法,并对鸡杆菌分离株进行种类鉴定,本研究根据GenBank中G.anatis12656-12株的gtxA基因序列设计一对PCR引物,合成扩增rpoB基因的引物作为内参基因,建立了G.anatis双重PCR检测方法.检测结果显示:以G.anatis Yu-PDS-RZ-1-SLG株DNA为模板进行的双重PCR检测能够扩增出两条目的片段;其它16株细菌包括副鸡禽杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、福氏志贺菌和奇异变形杆菌均只扩增出了一条目的片段;该方法可以检测到浓度为6.5×102 cfu/mL的G.anatis;34株鸡杆菌分离株均扩增出了两条预期大小的目的片段.此外,序列分析结果表明,10株鸡杆菌河南分离株的rpoB基因序列与鸭源鸡杆菌种参考株(CCUG15563)的同源性最高(97.5%~99.0%),属于鸭源鸡杆菌种.本研究建立的G.anatis双重PCR检测方法,可用于含gtxA基因鸡杆菌菌株的鉴定及临床病原学诊断.

关 键 词:鸭源鸡杆菌  双重PCR  gtxA基因  rpoB基因  同源性分析

Preliminary development of a duplex PCR assay for detecting Gallibacterium anatis
Abstract:
Keywords:Gallibacterium anatis  duplex PCR  gtxA gene  rpoB gene  homology analysis
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