抗猪PD-L1分子的单克隆抗体制备及免疫学特性分析 |
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引用本文: | 彭金美,李登云,郭娟娟,安同庆,孙艳,吴玉全,陈家锃,冷超粮,田志军. 抗猪PD-L1分子的单克隆抗体制备及免疫学特性分析[J]. 中国预防兽医学报, 2013, 35(7) |
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作者姓名: | 彭金美 李登云 郭娟娟 安同庆 孙艳 吴玉全 陈家锃 冷超粮 田志军 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001 2. 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100 |
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摘 要: | 为制备抗猪程序性死亡因子配体1 (PD-L1)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其免疫学特性,本研究将猪PD-L1基因的外膜区利用原核表达载体pET32a进行表达,以纯化的表达蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,以表达PD-L1-Fc蛋白的293T细胞作为抗原,采用间接免疫荧光试验筛选杂交瘤培养上清,获得两株稳定分泌抗猪PD-L1 MAb的杂交瘤细胞系.MAb亚型鉴定均为IgG1型,轻链为(K)链.Western blot试验表明这两株MAb均可以特异性识别PD-L1蛋白.流式细胞检测结果显示这两株MAb可以识别表达于293T细胞膜表面的PD-L1分子,但不能阻断PD-L1分子与其受体PD-1的结合.这两株MAb的获得为研究PD-1/PD-L1通路与猪的某些感染性疾病发展进程的关系提供了必要的检测工具.
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关 键 词: | PPD-L1分子 PD-1/PD-L1通路 单克隆抗体 |
Preparation of the anti-porcine PD-L1 monoclonal antibodies and analysis of their immunological characteristics |
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Abstract: | |
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Keywords: | PD-L1,PD-1/PD-LI pathway monoclonal antibody |
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