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跨膜丝氨酸蛋白酶-4对2009甲型H1N1流感病毒HA的切割及其融合活性研究
引用本文:吴超,温志远,陈伟业,施建忠,葛金英,步志高. 跨膜丝氨酸蛋白酶-4对2009甲型H1N1流感病毒HA的切割及其融合活性研究[J]. 中国预防兽医学报, 2013, 35(7)
作者姓名:吴超  温志远  陈伟业  施建忠  葛金英  步志高
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨,150001
2. 农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江哈尔滨,150001
摘    要:流感病毒血凝素(HA)被宿主蛋白酶切割活化是流感病毒复制和扩散的关键步骤.2009甲型H1N1流感病毒HA的裂解位点为单碱性氨基酸,只能被宿主特定组织部位表达的某些蛋白酶所切割活化.本研究构建了主要存在于人呼吸道和肺脏的跨膜丝氨酸蛋白酶4 (TMPRSS4)的真核表达重组质粒pCA-TMPRSS4-Flag与表达2009甲型H1N1流感病毒中国四川分离株HA的真核重组表达质粒pCA-SCHA共转染293T细胞,利用westernblot证明2009甲型H1N1流感病毒的HA蛋白能够被TMPRSS4切割;通过激光共聚焦确定TMPRSS4和HA在293T细胞膜上共定位;并进一步通过细胞融合试验证明经正确切割的HA具有在低pH条件下介导细胞膜发生融合的生物学功能.本实验为研究自然感染情况下参与活化流感病毒的宿主胰蛋白酶提供了实验依据.

关 键 词:2009甲型H1N1流感病毒  跨膜丝氨酸蛋白酶-4  血凝素  细胞融合

The cleavage of 2009 pandemic influenza HA protein by TMPRSS4 and induced cell fusion activity in vitro
WU Chao , WEN Zhi-yuan , CHEN Wei-ye , SHI Jian-zhong , GE Jin-ying , BU Zhi-gao. The cleavage of 2009 pandemic influenza HA protein by TMPRSS4 and induced cell fusion activity in vitro[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2013, 35(7)
Authors:WU Chao    WEN Zhi-yuan    CHEN Wei-ye    SHI Jian-zhong    GE Jin-ying    BU Zhi-gao
Abstract:
Keywords:2009 pandemic influenza  TMPRSS4  hemagglutinin  cell fusion
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