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犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立
引用本文:孙婧,毕振威,夏兴霞,王晓丽,诸玉梅,董晨红,贾红,朱瑞良,王永山.犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(8).
作者姓名:孙婧  毕振威  夏兴霞  王晓丽  诸玉梅  董晨红  贾红  朱瑞良  王永山
作者单位:1. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京210014
2. 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京,210014
3. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193
4. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271018
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金项目,公益性行业(农业)科研专项
摘    要:为建立方便快捷的犬瘟热病毒(CDV)检测方法,本实验应用杂交瘤细胞融合技术,建立了4株分泌抗CDV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F7、H4和G12.相加ELISA试验显示4株MAb作用于CDV不同的抗原表位.选取相加指数较高的两株MAb G12和A2分别作为捕获抗体和酶标检测抗体,建立检测CDV的夹心ELISA检测方法,并对实验条件进行了优化.结果显示,该方法与犬细小病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒1型、犬冠状病毒等犬类病毒无交叉反应,敏感度为5 μg/mL,变异系数小于6%.利用该方法与RT-PCR方法同时检测57份临床样品,两种方法的符合率为100%.本实验建立的MAb夹心ELISA方法具有特异、敏感、方便快捷等优点,适用于大批量临床样品检测.

关 键 词:犬瘟热病毒  杂交瘤细胞株  单克隆抗体  夹心ELISA

Development of a sandwich ELISA based on monoclonal antibodies against canine distemper virus
Abstract:
Keywords:canine distemper virus  hybridoma  monoclonal antibody  sandwich ELISA
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