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新城疫病毒疫苗株F蛋白裂解位点改造对诱导HepG2细胞发生自噬的影响
引用本文:吴云舟,安莹,孙田,何金娇,王卉,朱升龙,田贵游,尹杰超,张天援. 新城疫病毒疫苗株F蛋白裂解位点改造对诱导HepG2细胞发生自噬的影响[J]. 中国预防兽医学报, 2013, 35(9)
作者姓名:吴云舟  安莹  孙田  何金娇  王卉  朱升龙  田贵游  尹杰超  张天援
作者单位:东北农业大学生命科学学院/生物制药学教研室,黑龙江哈尔滨,150030
基金项目:黑龙江省青年基金,东北农业大学博士启动基金
摘    要:新城疫病毒(NDV)通过启动不依赖p53的内源性凋亡通路特异性诱导肿瘤细胞凋亡.最新研究表明NDV可以引起U251肿瘤细胞发生自噬,并在后期导致细胞凋亡,但其机理尚不清楚.本研究通过反向遗传操作技术对NDV Clone30疫苗株F蛋白的碱性裂解位点进行突变,将F蛋白的裂解位点由弱毒株的GGRQGR ↓ L突变为强毒株的GRRQRR ↓ F基序,并成功拯救出突变改造病毒rC30-FmF.分别将Clone30野生型病毒株rC30-wt与rC30-FmF感染HepG2肝癌细胞,通过透射电镜检测细胞超微结构显示,rC30-FmF感染4h后细胞内出现大量自噬小体及自噬溶酶体.通过westem blot检测自噬标志蛋白LC-3 Ⅱ表明,rC30-FmF感染4h后LC3Ⅱ表达量显著上调,与rC30-wt对照组相比差异极显著(p<0.01).研究表明,rC30-FmF可以在感染早期增加HepG2细胞自噬程度.从而初步证明F蛋白的裂解位点在诱导HepG2细胞自噬过程中具有关键作用.

关 键 词:重组新城疫病毒  F蛋白  自噬

The effect of cleavage site of Newcastle disease virus F protein on the induction of autophagy in HepG2 cell line
Abstract:
Keywords:recombinant Newcastle disease virus  F gene  autophagy
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