| 猪鼻支原体TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法的建立 |
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| 引用本文： | 白方方,武昱孜,刘茂军,冯志新,熊祺琰,韦艳娜,马庆红,邵国青.猪鼻支原体TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(10). |
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| 作者姓名： | 白方方 武昱孜 刘茂军 冯志新 熊祺琰 韦艳娜 马庆红 邵国青 |
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| 作者单位： | 江苏省农业科学院兽医研究所 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014 |
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| 基金项目： | 江苏省农业科技创新基金(cx |
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| 摘 要： | 为建立快速检测猪鼻支原体(M.hyorhinis)的荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的p37基因序列设计并合成引物及MGB探针,构建含有p37基因的重组质粒,以其为标准品绘制标准曲线,并检测该方法的特异性、敏感性和重复性.结果显示该方法具有良好的特异性,与猪肺炎支原体、猪絮状支原体、猪滑液支原体、鸡毒支原体、副猪嗜血杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪圆环病毒、猪瘟病毒及猪流感病毒无交叉反应,对M.hyorhinis的检测敏感性为10拷贝/μL,并且稳定性好,变异系数小于2％.利用建立的荧光定量PCR方法对55份临床样品进行检测,阳性检出率为87.3％(48/55),而分离培养方法和普通PCR的阳性检出率分别为41.8％(23/55)和29.1％ (16/55).该结果表明,建立的方法特异性强、敏感性高、稳定性好,可以用于M.hyorhinis临床样品的检测,对M.hyorhinis的快速和定量检测具有重要意义.
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| 关 键 词： | 猪鼻支原体 p37基因 荧光定量PCR |
Development of TaqMan MGB probe real-time PCR for detection of Mycoplasma hyorhinis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycoplasma hyorhinis p37 gene real-time PCR |
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