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牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的克隆及原核表达分析
引用本文:贾立军,张守发,李男礼. 牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的克隆及原核表达分析[J]. 中国预防兽医学报, 2013, 35(9)
作者姓名:贾立军  张守发  李男礼
作者单位:延边大学农学院动物医学系,吉林延吉,133002
基金项目:国家自然科学基金,吉林省青年科研基金,吉林省自然科学基金,延边大学科技发展计划
摘    要:为了解牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的生物学特性,本实验采用PCR技术扩增牛源犬新孢子虫NcGRA7基因,并连接至pMD-18T载体中,构建重组质粒pMD 18-NcGRA7,经PCR、酶切鉴定及测序分析,将NcGRA7基因连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-NcGRA7,转化大肠杆菌BL21,筛选阳性克隆,将PCR和酶切鉴定正确的重组质粒进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE和westem blot分析表达产物.结果表明,扩增的NcGRA7基因片段大小为701 bp,编码233个氨基酸,与GenBank中登录的NcGRA7(AF176649)核苷酸序列同源性为98.7%;western blot分析表达蛋白的分子量为52 ku,具有较好的反应原性.本实验为犬新孢子虫NcGRA7基因疫苗研究奠定了基础.

关 键 词:  犬新孢子虫  NcGRA7  原核表达

Cloning and prokaryotic expression of bovine Neospora caninum NcGRA7 gene
JIA Li-jun , ZHANG Shou-fa , LI Nan-li. Cloning and prokaryotic expression of bovine Neospora caninum NcGRA7 gene[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2013, 35(9)
Authors:JIA Li-jun    ZHANG Shou-fa    LI Nan-li
Abstract:
Keywords:bovine  Neospora caninum  NcGRA7  prokaryotic expression
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