猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选 |
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引用本文: | 廖亚金,李素,贺番,何文瑞,董泓,冯烁,孙元,仇华吉. 猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选[J]. 中国预防兽医学报, 2013, 35(9) |
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作者姓名: | 廖亚金 李素 贺番 何文瑞 董泓 冯烁 孙元 仇华吉 |
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作者单位: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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基金项目: | 中国农业科学院基本科研业务费预算增量项目 |
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摘 要: | 为研究猪瘟病-毒(CSFV)蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用,本研究通过SMART技术合成猪外周血单个核细胞(PBMC)双链cDNA,以携带与载体pGADT7-Rec重组位点同源序列的特异引物经long-distance PCR扩增双链cDNA.纯化双链cDNA并与载体pGADT7-Rec共转化酵母菌株Y187,经同源重组构建PBMC cDNA酵母表达文库.以CSFV E2蛋白为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证.结果显示筛选到17个与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,基因注释(GO)分析表明这些蛋白分别参与免疫、代谢、细胞生长与增殖、生物调节等过程,为研究它们与CSFV E2的相互作用奠定了基础.
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关 键 词: | 猪瘟病毒 PBMC cDNA文库 酵母双杂交 E2蛋白 |
Construction of a yeast expression library of PBMC and screen of classical swine fever virus E2-interacting proteins |
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Abstract: | |
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Keywords: | classical swine fever virus PBMC cDNA library yeast two-hybrid assay E2 protein |
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