| “睡美人”转座子系统介导EGFP转染鸡SSCs条件优化的研究 |
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| 引用本文： | 李碧春,陈强,高波,田智泉,余飞,何先红,宋成义,常国斌,王克华.“睡美人”转座子系统介导EGFP转染鸡SSCs条件优化的研究[J].中国家禽,2009,31(1). |
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| 作者姓名： | 李碧春 陈强 高波 田智泉 余飞 何先红 宋成义 常国斌 王克华 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学动物科学与技术学院,江苏,扬州,225009
2. 江苏省家禽科学研究所,江苏,扬州,225003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，高等学校博士学科点专嘎科研基金，国家高技术研究发展计划(863计划)，江苏省自然科学基金，江苏省高校自然科学重大基础研究项目 |
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| 摘 要： | 利用"睡美人"转座子系统介导增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)报告基因,比较和优化了电穿孔转染条件和精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)对G418的耐受能力.结果表明,在SB与PT-EGFP的比为1:10,质粒浓度为15μg/mL,细胞处于对数生长期,且细胞密度为106~107/mL时,精原干细胞在电场强度为270V,脉冲时程为80μs,转染后在4℃静置10 min的条件下转染效率最高.浓度为400 μg/mL的G418对转染后的SSCs进行快速筛选6d时,出现了EGFP阳性克隆.
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| 关 键 词： | 转座子 电穿孔 精原干细胞 增强型绿色荧光蛋白 |
Optimizing Conditions of Transfecting Chicken SSCs with EGFP by the Sleeping Beauty Transposon |
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| LI Bichun,CHEN Qiang,GAO Bo,TIAN Zhiquan,YU Fei,HE Xianhong,SONG Chengyi,CHANG Guobin,WANG Kehua.Optimizing Conditions of Transfecting Chicken SSCs with EGFP by the Sleeping Beauty Transposon[J].China Poultry,2009,31(1). |
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| Authors: | LI Bichun CHEN Qiang GAO Bo TIAN Zhiquan YU Fei HE Xianhong SONG Chengyi CHANG Guobin WANG Kehua |
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