| 解淀粉芽孢杆菌ASR-12抗菌蛋白的分离纯化 及其编码基因克隆 |
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| 引用本文： | 王彪,何鹏飞,王再强,吴毅歆,何朋杰,崔文艳,何月秋.解淀粉芽孢杆菌ASR-12抗菌蛋白的分离纯化 及其编码基因克隆[J].安徽农业大学学报,2020,47(2):299. |
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| 作者姓名： | 王彪 何鹏飞 王再强 吴毅歆 何朋杰 崔文艳 何月秋 |
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| 作者单位： | 云南农业大学植物保护学院，昆明650201;云南农业大学农学与生物技术学院，昆明650201; 微生物菌种筛选与应用国家地方联合工程研究中心，昆明650217 |
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| 基金项目： | 科技部“十三.五“重点研发计划项目（2018YFD0201200）和云南省自然科学基金（2017FB051）共同资助。 |
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| 摘 要： | 为了从菌株ASR-12发酵液中分离纯化获得抗菌蛋白。将菌株ASR-12发酵液经硫酸铵沉淀、透析除盐后获得粗蛋白,粗蛋白进行热处理和Q Sepharose Fast Flow柱层析,纯化后的蛋白进一步进行LC-MS鉴定,并克隆其编码基因进行测序。粗蛋白经热处理和柱层析后得到5个吸收峰,活性检测结果显示峰Ⅳ具有较高抑菌活性,经SDS-PAGE检测显示为单一条带,分子量约为50k Da。LC-MS鉴定结果显示抗菌蛋白与M42家族肽酶同源性最高,覆盖度达到80%;并能从菌株ASR-12基因组中克隆到M42家族肽酶编码基因,测序结果经BLAST比对与解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2的M42家族肽酶编码基因同源性达100%。菌株ASR-12产生的抗菌蛋白中,M42家族肽酶为主要活性成分。
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| 关 键 词： | 硫酸铵沉淀 分离纯化 抑菌活性 基因克隆 |
Isolation and purification of antimicrobial protein from Bacillus amyloliquefaciens ASR-12 and cloning of its coding gene |
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| WANG Biao,HE Pengfei,WANG Zaiqiang,WU Yixin,HE Pengjie,CUI Wenyan,HE Yueqiu.Isolation and purification of antimicrobial protein from Bacillus amyloliquefaciens ASR-12 and cloning of its coding gene[J].Journal of Anhui Agricultural University,2020,47(2):299. |
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| Authors: | WANG Biao HE Pengfei WANG Zaiqiang WU Yixin HE Pengjie CUI Wenyan HE Yueqiu |
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| Institution: | College of Plant Protection, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201;College of Agronomy and Biotechnology, YAU, Kunming 650201; National and Local Joint Engineering Research Center for Screening and Application of Microbial Strains, Kunming 650217 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ammonium sulfate precipitation isolation and purification antagonistic activity gene clone |
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