| 团头鲂tf和tfr1a基因启动子克隆及转录调控分析 |
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| 引用本文： | 王济秀,张锋,王卫民,刘红. 团头鲂tf和tfr1a基因启动子克隆及转录调控分析[J]. 水产学报, 2020, 44(4): 528-538 |
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| 作者姓名： | 王济秀 张锋 王卫民 刘红 |
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| 作者单位： | 华中农业大学水产学院,农业农村部淡水生物繁育重点实验室,湖北武汉 430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31572613)；湖北省协同创新中心建设专项资金(2016ZXPY04) |
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| 摘 要： | 为探索鱼类转铁蛋白基因tf和转铁蛋白受体基因tfr1a的转录调控机制,本实验以团头鲂为研究对象,在其全基因组数据库中获取tf和tfr1a基因序列,对2个基因候选启动子区转录因子结合位点及CpG岛进行预测,通过PCR方法克隆得到tf和tfr1a基因近端启动子区不同长度片段,连接至pGL3-Basic/pEGFP-1载体,瞬时转染入Hela细胞,并采用双荧光素酶报告基因检测系统进行检测。结果发现,团头鲂tf基因启动子区无CpG岛位点,而tfr1a基因启动子区有2个CpG岛位点。成功构建9个tf和10个tfr1a不同长度启动子片段的重组质粒,经双荧光素酶报告基因系统检测发现,tf启动子核心区域为-268～+56 bp,且-1 308～-1 102 bp片段可能存在正调控该基因表达的转录因子结合位点;tfr1a启动子核心区域为-224～+48 bp,且+48～+92 bp可能存在抑制该基因转录的负调控元件,而-1 229～-1 219 bp区域可能存在促进tfr1a基因表达的正调控转录因子结合位点。
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| 关 键 词： | 团头鲂 tf基因 tfr1a基因 启动子 转录调控 |
| 收稿时间： | 2019-03-25 |
| 修稿时间： | 2019-06-02 |
Cloning and transcriptional regulation of tf and tfr1a promoters in Megalobrama amblycephala |
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| WANG Jixiu,ZHANG Feng,WANG Weimin and LIU Hong. Cloning and transcriptional regulation of tf and tfr1a promoters in Megalobrama amblycephala[J]. Journal of Fisheries of China, 2020, 44(4): 528-538 |
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| Authors: | WANG Jixiu ZHANG Feng WANG Weimin LIU Hong |
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| Affiliation: | Key Lab of Freshwater Animal Breeding, College of Fisheries, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China,Key Lab of Freshwater Animal Breeding, College of Fisheries, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China,Key Lab of Freshwater Animal Breeding, College of Fisheries, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China and Key Lab of Freshwater Animal Breeding, College of Fisheries, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China |
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| Abstract: | |
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