| 利用绿色荧光蛋白标记产肠毒素大肠杆菌F4ac |
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| 引用本文： | 靳荣理,薛鹏翔,范庆花,马晓云,唐辉,张勤,王文文.利用绿色荧光蛋白标记产肠毒素大肠杆菌F4ac[J].中国动物检疫,2023,40(3):111-117. |
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| 作者姓名： | 靳荣理 薛鹏翔 范庆花 马晓云 唐辉 张勤 王文文 |
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| 作者单位： | 山东农业大学动物科技学院,山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,农业农村部非粮饲料资源高效利用重点实验室(部省共建) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（32172711，31702093）；山东省重点研发计划项目（2022LZGC003，2021LZGC001，2020LZGC012）；三亚崖州湾科技城管理局科研项目（SKJC-2020-02-007） |
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| 摘 要： | 利用电击转化法将表达绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的原核表达载体pTurboGFP-B转化到产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC）F4ac中，获得表达绿色荧光的菌株ETEC F4ac-GFP。聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）结果显示，转化菌株表达绿色荧光蛋白编码基因，且可以在蓝光仪和荧光显微镜下清晰地观察到转化菌株发出绿色荧光；将ETEC F4ac-GFP与IPEC-J2细胞系进行体外粘附试验，在细胞水平验证了转化菌株荧光表达的稳定性与可靠性，且ETEC F4ac导入荧光质粒后不改变其对宿主细胞的胞粘附能力。CCK-8(Cell Counting Kit-8)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明，ETEC F4ac导入荧光质粒后不改变其对宿主细胞的毒力。本研究为深入探究ETEC F4ac致病机理提供了工具菌株。
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| 关 键 词： | 产肠毒素大肠杆菌F4ac 绿色荧光蛋白 粘附 稳定性 |
Labeling Enterotoxigenic Escherichia coli F4ac with Green Fluorescent Protein |
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| Jin Rongli,Xue Pengxiang,Fan Qinghu,Ma Xiaoyun,Tang Hui,Zhang Qin,Wang Wenwen.Labeling Enterotoxigenic Escherichia coli F4ac with Green Fluorescent Protein[J].China Journal Of Animal Quarantine,2023,40(3):111-117. |
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| Authors: | Jin Rongli Xue Pengxiang Fan Qinghu Ma Xiaoyun Tang Hui Zhang Qin Wang Wenwen |
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