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燕麦AFLP反应体系的建立与优化
引用本文:刘欢,赵桂琴,耿小丽,刘翠茹. 燕麦AFLP反应体系的建立与优化[J]. 草业科学, 2008, 25(2): 84-89
作者姓名:刘欢  赵桂琴  耿小丽  刘翠茹
作者单位:甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070
基金项目:农业行业科研专项,国家引进国际先进农业科学技术计划(948计划)
摘    要:在利用扩增片断长度多态性(AFLP)技术研究燕麦Avena sativa遗传多样性过程中,从引物筛选、酶切连接、扩增条件、检测方法等几个方面进行优化,建立燕麦AFLP最适反应体系为:800ng/μL DNA 用10 U EcoRⅠ和4 U MseⅠ在37 ℃ 7 h,65 ℃ 4 h温浴双酶切; 16 ℃下连接过夜;预扩增取连接产物1 μL,10 μmol/L预扩引物各0.6 μL, 10×buffer 2μL, dNTPS 2μL,ddH2O 补平至20 μL;取5μL稀释 20 倍后的预扩增产物,50 ng/μL EcoRⅠ、MseⅠ选扩引物各0.8μL,总体系20 μL进行选择性扩增.在此优化体系下,可以得到重复性好、稳定且多态性高的燕麦AFLP条带.

关 键 词:AFLP反应体系  优化
文章编号:1001-0629(2008)02-0084-06
收稿时间:2007-03-08
修稿时间:2007-03-08

Establishment and optimization of an AFLP reaction system for oats
LIU huan,ZHAO Gui-qin,GENG Xiao-li,LIU Cui-ru. Establishment and optimization of an AFLP reaction system for oats[J]. Pratacultural Science, 2008, 25(2): 84-89
Authors:LIU huan  ZHAO Gui-qin  GENG Xiao-li  LIU Cui-ru
Abstract:
Keywords:oat  AFLP reaction system  optimization
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