(木奈)基因组DNA的提取与纯化 |
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引用本文: | 陈桂信,吕柳新,赖钟雄,潘东明. (木奈)基因组DNA的提取与纯化[J]. 江西农业大学学报, 2004, 26(3) |
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作者姓名: | 陈桂信 吕柳新 赖钟雄 潘东明 |
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作者单位: | 福建农林大学,园艺学院,福建,福州,350002;福建农林大学,亚热带果树研究所,福建,福州,350002 |
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基金项目: | 引进国际先进农业科技计划(948计划),福建省科技厅科研项目,福建省教育厅科研项目 |
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摘 要: | 以(木奈)嫩芽为材料,对Dellaporta等用CTAB制备植物基因组DNA的方法进行改良,结果表明,加入质量分数ω=10% PVPP与材料充分研磨,将提取缓冲液的β-巯基乙醇体积分数降低为1%,能有效地去除材料中的多酚类物质;用氯仿/异戊醇(24∶ 1)抽提裂解液2次所获得的上相,加入1/10体积的65 ℃的NaCl/CTAB溶液混匀,再用氯仿/异戊醇(24∶ 1)连续抽提2次,并在DNA粗提液中加入适量高浓度NaCl和无水乙醇沉淀DNA,可以有效地去除多糖的干扰,获得比较纯净的DNA样品;PCR特异性扩增的结果表明,以改良法的DNA为模板可获得PPO基因保守区约600~800 bp特异条带,且扩增条带较亮、无引物二聚体出现.
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关 键 词: | (木奈) 基因组DNA 提取 纯化 |
Extraction and purification of genomic DNA in Nai (Prunus salicina Lindl.var.cordata) |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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