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中国美利奴绵羊MHC ClassⅡb区349I12 BAC克隆插入片段基因组成与结构分析
引用本文:白大章,李桂芳,董慧芹,邱 巍,杨小亮,陈 芳,马润林,高剑峰.中国美利奴绵羊MHC ClassⅡb区349I12 BAC克隆插入片段基因组成与结构分析[J].西北农业学报,2011,20(8):6-11.
作者姓名:白大章  李桂芳  董慧芹  邱 巍  杨小亮  陈 芳  马润林  高剑峰
作者单位:1. 石河子大学生命科学学院,新疆石河子,832003
2. 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101
基金项目:国家科技部国际合作重大项目(2006DFB33750); 国家“973”项目(2010CB530200)
摘    要:利用已测序的中国美利奴绵羊细菌人工染色体(BAC)文库MHC区段阳性克隆插入片段制备探针,筛选中国美利奴绵羊(新疆军垦型)混合组织cDNA文库,以期获得该MHC片段的基因组成与结构信息。用中国美利奴绵羊MHC ClassⅡb区域内的349I12 BAC克隆,BsaJⅠ酶切后制备α-32P放射性探针,以噬菌斑原位杂交筛选正常中国美利奴绵羊cDNA文库,并将分离所得的cDNA阳性克隆测序后进行基因结构分析。以349I12 BAC克隆制备探针经过两轮的噬菌斑原位杂交筛选,获得19个cDNA阳性克隆,经测序、比对等进一步分析确定获得17条不同序列,其中7条序列与免疫相关。绵羊20号染色体上的MHC区段包含表达序列,且多为断裂基因,对其基因结构的分析将有助于相应基因功能及调控方面的研究。

关 键 词:细菌人工染色体(BAC)  cDNA表达文库  放射性探针  噬菌斑原位杂交
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