中国美利奴绵羊MHC ClassⅡb区349I12 BAC克隆插入片段基因组成与结构分析 |
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作者姓名: | 白大章 李桂芳 董慧芹 邱 巍 杨小亮 陈 芳 马润林 高剑峰 |
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作者单位: | 1. 石河子大学生命科学学院,新疆石河子,832003 2. 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101 |
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基金项目: | 国家科技部国际合作重大项目(2006DFB33750); 国家“973”项目(2010CB530200) |
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摘 要: | 利用已测序的中国美利奴绵羊细菌人工染色体(BAC)文库MHC区段阳性克隆插入片段制备探针,筛选中国美利奴绵羊(新疆军垦型)混合组织cDNA文库,以期获得该MHC片段的基因组成与结构信息。用中国美利奴绵羊MHC ClassⅡb区域内的349I12 BAC克隆,BsaJⅠ酶切后制备α-32P放射性探针,以噬菌斑原位杂交筛选正常中国美利奴绵羊cDNA文库,并将分离所得的cDNA阳性克隆测序后进行基因结构分析。以349I12 BAC克隆制备探针经过两轮的噬菌斑原位杂交筛选,获得19个cDNA阳性克隆,经测序、比对等进一步分析确定获得17条不同序列,其中7条序列与免疫相关。绵羊20号染色体上的MHC区段包含表达序列,且多为断裂基因,对其基因结构的分析将有助于相应基因功能及调控方面的研究。
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关 键 词: | 细菌人工染色体(BAC) cDNA表达文库 放射性探针 噬菌斑原位杂交 |
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