| 针茅属植物RAPD条件优化 |
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| 引用本文： | 萌莉,韩冰,张红梅,万雪龙,张刚.针茅属植物RAPD条件优化[J].干旱区资源与环境,2003,17(1):96-99. |
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| 作者姓名： | 萌莉 韩冰 张红梅 万雪龙 张刚 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古农业大学生态环境学院
2. 内蒙古农业大学生物工程系,呼和浩特,010020 |
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| 基金项目： | 国家自然基金 (批准号 :30 0 6 0 0 15 )，内蒙古自然基金 (批准号 :2 0 0 0 130 3)资助项目。 |
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| 摘 要： | 本试验以针茅属 ( Stipa L.)植物为材料 ,使用 CTAB法提取其基因组 DNA,通过对 RAPD( Random amplified polymorphic NDA,随机扩增的多态性 )条件优化分析 ,初步确定了针茅属植物 RAPD的最佳方案 ,即在 PCR扩增程序为 94℃预变性 3min,94℃变性 1 min,37℃复性 1 min,72℃延伸 1 .5 min,设 45个循环 ,最后 72℃保温 5 min时 ,2 5μL反应体系中包括 :0 .2 μL( 1 0 mmol/L) d NTPs,2 .0 μL( 1 0 mmol/L) Mg2 + ,0 .5 μL( 1 0 0 pmol/μL)引物 ,模板DNA80 ng,Taq酶 ( Sangon) 1 .0 U,2 .5 μL1 0×buffer缓冲液 ,其余部分用无菌三蒸水补平可以得到较好的扩增结果。
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| 关 键 词： | 针茅属植物 RAPD 条件优化 |
| 文章编号： | 1003-7578(2003)01-096-04 |
| 修稿时间： | 2002年3月19日 |
Optimal of RAPD amplification on Stipa L. |
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| ZHAO Meng-li,HAN Bing,ZHANG Hong-mei,WAN Xue-long,ZHANG Gang.Optimal of RAPD amplification on Stipa L.[J].Journal of Arid Land Resources and Environment,2003,17(1):96-99. |
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| Authors: | ZHAO Meng-li HAN Bing ZHANG Hong-mei WAN Xue-long ZHANG Gang |
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| Institution: | ZHAO Meng-li 1 HAN Bing 2 ZHANG Hong-mei 1 WAN Xue-long 1 ZHANG Gang 2 |
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| Abstract: | CTAB method was used to extract genome DNA from plant material of Stipa L.Through optimal analysis of RAPD,a PCR amplification program was determined.When the amplification was performed as,94℃ pre-denaturation for 3min,45cycles of 94℃ for 1min,37℃ for 1min,72℃ for 1.5min,and 5min 72℃ extension,the 25μL reaction mixture contained 80ng DNA sample,0.2μL(10mmol/L) of each dNTP,2.0μL(10mmol/L) Mg 2+ ,0.5μL(100pmol/μL) primer,2.5X taq polymerase buffer,and 1 unit Taq polymerase(Sangon). |
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| Keywords: | Stiap L RAPD optimal |
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