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| 猪圆环病毒2型(PCV2) Cap基因原核表达及抗血清制备 | |
| 作者单位： | ;1.吉林农业大学动物科技学院;2.军事医学研究院军事兽医研究所省部共建吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室 |
| 摘 要： | Cap蛋白作为猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)的重要结构蛋白,可以实现诱导机体免疫保护。以本实验室分离保存的PCV2毒株的Cap基因作为模板,设计特异性引物进行PCR扩增,并将该PCR产物连接至原核表达载体pET-28a上,获得重组质粒pET-28a-PCV2 Cap。将验证正确的菌种接入HB-pET自诱导培养基,过夜培养,SDS-PAGE及Western blot验证其表达,可获得28 000左右的目的蛋白。利用亲和层析技术纯化PCV2 Cap蛋白,免疫BALB/c小鼠获得小鼠阳性血清,通过ELISA方法检测其效价,并用Western blot验证其活性。结果显示,本试验成功应用大肠杆菌表达了PCV2 Cap蛋白,表达的蛋白具有免疫原性,并获得小鼠阳性血清,为PCV2 Cap蛋白的功能研究、鉴定、抗体及疫苗研制和病原检测奠定理论基础。 |
| 关 键 词： | PCV2 Cap基因 原核表达 小鼠阳性血清 |
Prokaryotic expression and antiserum preparation of PCV2 Cap gene |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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