猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪鼻支原体双重PCR检测方法的建立

为建立一种快速同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪鼻支原体(Mhr)的方法,根据GenBank中已登录的PRRSV ORF 7基因序列和Mhr P37基因序列,设计2对特异性引物,通过对扩增条件进行优化,建立了能够同时检测PRRSV和Mhr的双重PCR方法。该方法可以同时扩增出PRRSV的234 bp和Mhr的737 bp特异性片段,该方法特异性好,不与其他常见猪病病原体发生交叉反应,对PRRSV和Mhr重组质粒标准品的最低检出量分别为420拷贝/μL和180拷贝/μL。用85份临床病料对本试验双重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为100%。表明所建立的双重PCR特异性强,重复性好,敏感性高,为PRRSV和Mhr的快速检测提供了有效的技术支持。