马抗天花病毒免疫球蛋白F(ab′)_2的制备及免疫防护效果评价

采用鸡胚成纤维原代细胞培养痘苗病毒天坛株抗原,甲醛灭活后,利用密度梯度离心法和层析法两步纯化抗原,加入等量ISA206佐剂充分乳化,免疫健康马匹,当中和抗体效价达1∶3 200时,采血,分离血清,按照免疫球蛋白F(ab′)_2生产工艺制备治疗性抗体成品,并对其进行中和抗体效价、防护效力、安全性检测。结果显示,鸡胚成纤维原代细胞培养痘苗病毒天坛株滴度均在1.0×10~7 PFU/mL以上;纯化的抗原纯度在90%以上;纯化的F(ab′)_2成品,纯度在90%以上,中和抗体效价超过1∶3 200,有很好的免疫防护效力,安全性符合现行《中国药典》要求。结果表明,建立了马抗天花病毒免疫球蛋白F(ab′)_2制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为天花治疗提供了新的救命药。